制品内容 (250 U) |
Fast Taq DNA聚合酶(5 U/μl) | 50 μl | 2 × GT PCR Reaction Mix | 2000 μl | |
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· 制品说明 |
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SinoBio Fast Genotyping PCR Kit超敏基因组PCR扩增检测试剂盒(快速型)专门为基因组及微量DNA PCR扩增检测设计优化,可从少量基因组模板中高效扩增出0.2kb~4kb的目的条带,其灵敏度为普通PCR反应的100~10,000倍。适用于基因组PCR扩增、微量模板、复杂模板等的扩增和大规模基因检测。 针对普通Genotyping PCR循环数目多(40次循环),反应时间较长缺陷,超敏基因组PCR扩增检测试剂盒(快速型)采用SinoBio FastTaqDNA聚合酶,该酶是利用分子进化技术在普通Taq酶基础上改造、制备的新型FastTaq DNA聚合酶,其扩增速度大幅提高,至少为普通Taq酶的4倍,因此大大缩短了基因组PCR扩增检测所需的时间。 本产品包括2X反应缓冲体系和酶2个独立的组分,其2X Reaction Mix包含了genotyping PCR所需的全部试剂、dNTP及PCR增强剂。本产品使用方便快捷,使用时只需在2X Reaction Mix加入引物、模板及酶并加入去离子水稀释至1X即可进行反应。2X Reaction Mix提供不含染料/含染料(蓝色)两种形式供您选择,经测试,染料的加入不影响扩增性能。2X Reaction Mix中预混蓝色染料的,在配置反应体系时,可很方便地检测各组分混匀情况,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。 | | |
· 用 途 |
适用于从复杂背景中扩增微量模板DNA。由于Genotyping PCR的突变率高于普通PCR反应,故其产物不推荐用于需高保真的基因克隆。Genotyping PCR所用引物需精心设计,否则会扩增出较多杂带,(参见PCR引物设计的黄金法则)。 |
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· 产品特点 |
本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测和微量DNA的检测。复杂模板(如含二级结构,GC rich,和重复序列等)的扩增:(如构建基因图谱、测序及分子遗传学研究等)。PCR产物如需克隆,纯化后可直接进行T/A载体克隆。 |
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· 质量保证 |
使用推荐体系及PCR程序,可从100ng人基因组DNA背景中扩增检测出1fg LacZ质粒模板的存在。 |
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· 使用建议 |
经测试按右侧反应体系及PCR程序可获得理想的扩增结果。推荐将此反应体系及PCR程序作为条件优化的初始反应。 |
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· 推荐体系及程序 |
超敏基因组PCR扩增检测反应体系 | 2X Reaction Mix | 10μl | 上游引物 | 0.05μM(终浓度) | 下游引物 | 0.05μM(终浓度) | 模板DNA | 1~100ng基因组DNA | FastTaq酶 | 0.25 | ddH2O | 至20μl | *反应体系可成比例调整至50μl等体积 | 超敏基因组PCR扩增检测PCR程序 | 93℃ | 1分钟30秒 | 40次循环 | 93℃,30秒 | | 57℃,30秒 | | (57℃适用于大多数反应亦可在55~60℃间调整) | | 65℃,按产物长度15秒/1kb计算 | |